Özet:

Bu çalışmada, bazı ağır metal iyonlarının metabolizmada önemli fonksiyonlara sahip olan glutatyon reduktaz (GR) enziminin aktivitesi üzerine inhibisyon etkileri araştırılmıştır. Bu amaçla, GR enzimi bıldırcın karaciğerinden amonyum sülfat çöktürmesi ve 2ʹ, 5ʹ-ADP Sepharose 4B afinite kromatografisi kullanılarak 19.33 EU/mg spesifik aktivite ile % 14.06 verimle 128.8 kat saflaştırılmıştır. GR enziminin saflığını kontrolü için, sodyum dodesil sülfat poliakrilamid jel elektroforezi (SDS-PAGE) yapıldı ve jelde tek bant gözlendi. GR enziminin aktivitesi, Carlberg ve Mannervik yöntemine göre 340 nm'de spektrofotometrik olarak ölçüldü. Daha sonra, GR enziminin aktivitesi üzerine farklı ağır metal iyonlarının (Co 2+, Zn 2+, Pb 2+, Fe 2+, Cd 2+,     Al 3+ ve Fe 3+) inhibisyon etkileri in vitro koşullarda araştırıldı. Bıldırcın karaciğer dokusundan saflaştırılan GR enzim aktivitesinin % 50'sinin in vitro koşullarda inhibe edildiği ağır metal konsantrasyonları (IC50) değerleri belirlendi. Son olarak, bu metal iyonları için Ki değerleri Lineweaver-Burk grafiğinden hesaplandı.

Anahtar Kelimeler: