Abstract:

Canlı organizmalardaki metabolik süreçler, enzimlerin katalitik aktivitesi ile yakından ilişkilidir. Enzimlerin inhibisyonu veya indüksiyonu toksisiteye ve metabolik etkileşimlere yol açar. Bu çalışma, PON1-fenolik madde etkileşimlerini inceleyerek büyüyen ilaç tasarım alanına katkıda bulunmayı amaçlamaktadır. Bu amaçla, paraoksonaz-1 enzimi, hızlı ve farklı kromatografik teknikler kullanılarak taze insan serumundan saflaştırılmıştır. Ek olarak, bazı fenolik bileşiklerin PON1 üzerindeki inhibisyon etkileri araştırılmış ve saflaştırılan enzimin 3945.15 EU mg-1 protein spesifik aktiviteye ve 43 kDa molekül ağırlığına sahip olduğu bulunmuştur. Bu bileşikler PON1’e karşı güçlü inhibisyon gösterdiler, özellikle homovanilik asit 13.84±0.08 mM’lık bir IC50 değeri ile PON1’e karşı önemli bir inhibisyon profili sergiledi. Ki sabitleri homovanillik asit için 6.10±0.26 mM ve phloridzin dihidrat için 16.96±0.76 mM idi. Homovanilik asit yarışmalı inhibisyona sahipken, phloridzin dihidrat PON1’i yarışmasız olarak inhibe etmiştir. Ayrıca, moleküler yerleştirme hesaplamaları Glide XP modu kullanılarak gerçekleştirilmiştir. Homovanilik asitin glide enerjisi -23.95 kcal mol-1 olarak belirlenmiştir.

Keywords: