Abstract:

Amaç: Çalışmamızda, Gd-Akdeniz’li bireylerde hemolitik anemisi olan ve olmayan olguların Glukoz-6-fosfat dehidrogenaz (G6PD) enzimi kinetiği ve G6PD geninin mRNA ekspresyon seviyeleri arasındaki ilişkinin irdelenerek bu duruma açıklık getirmeyi hedefledik. Gereç ve Yöntem: Çalışma grubu, Gd-Akdeniz mutasyonu bulunan 30 olgu ve enzim aktivite düzeyi referans aralığında olan 30 olgudan oluşmaktadır. G6PD aktivitesi Beutler yöntemi ile tayin edilmiştir. G6PD enzimi DE-52 anyon değiştirici reçine ile kısmi olarak saflaştırılarak kinetik özellikleri çalışılmıştır. MboII enzim kesimi ve sekans analizi ile Gd-Akdeniz mutasyonu genotiplendirilmiştir. G6PD geninin ekspresyon seviyesi 2-ΔΔCt formülüne göre hesaplanmıştır. Bulgular: Çalışmamızda Gd-Akdeniz mutasyonu bulunan olguların KmNADP+ ve KmG6P değerleri ile G6PD enzim aktivitesi referans değerlerde olan olgular arasında anlamlı düzeyde fark bulundu. Hemolitik anemisi olan ve olmayan Gd-Akdeniz mutasyonuna sahip olguların ise KmNADP+ ve KmG6P değerleri arasında anlamlı fark bulunamadı. Hemolitik anemisi olmayan 18 hastanın gen ekspresyon sonuçları, hemolitik anemisi olan 12 hastaya göre anlamlı derecede yüksek olduğu görüldü. Ayrıca enzim aktivite düzeyi referans aralığında olan olgularla da bu değişkenler kıyaslandığında yine anlamlı farklılık olduğu belirlendi Sonuç: Gd-Med mutasyonu olan olgularda enzimin substrat bağlanma bölgesinin post-transkripsiyonel veya post-translasyonel modifikasyonlara uğramış olması ve bu nedenle gen ekspresyonunun değişmesi olası bir açıklama olabilir. İleri çalışma olarak Gd-Akdeniz mutasyonuna sahip hemolitik anemisi bulunan olguların gen ekspresyonlarındaki azalmayı geninin promotör bölgesi değerlendirilerek açıklık getirilebilir.

Keywords: